3 spôsoby merania rastu baktérií

Existuje mnoho spôsobov merania rastu baktérií a niektoré sú zložitejšie ako iné. Hoci obetujete určitú konzistenciu pri meraní, najjednoduchšie metódy sú dostatočne presné a bežne sa používajú. Najznámejšie metódy sú pozorovanie a počítanie baktérií, meranie mokrej alebo suchej hmotnosti a meranie zákalu. Školské laboratórium by malo mať vybavenie a pomôcky na vykonanie aspoň jedného z týchto pokusov.[1]

Metóda 1 z 3: Priame pozorovanie baktérií


Zhromaždite si materiál. Existuje niekoľko špeciálnych nástrojov, ktoré by ste mali mať okrem tých, ktoré sú vo väčšine biologických laboratórií. Ak budete mať nástroje a nádoby vopred, umožní vám to dokončiť pokus bez toho, aby ste museli behať sem a tam do kabinetu. Je dôležité vopred vedieť, na čo sa jednotlivé kusy použijú. Mali by ste poznať aj niektoré základné pojmy.

  • Získajte komôrku na počítanie. Tieto nástroje majú zabudovanú komôrku, sklíčko a mikroskop, takže sa ľahko nastavujú a používajú. Môžete si ich kúpiť v laboratóriách a učebniach. Dodávajú sa s návodom, ktorý vás prevedie celým procesom. [2]
  • Zoberte si nalievací tanier alebo tanier na roztieranie. Toto sú nádoby, v ktorých budete pozorovať baktérie.
  • Kultúra je termín, ktorý sa používa na označenie organizmu vypestovaného umelo na účely experimentu.
  • Vývar je tekuté médium, v ktorom kultúra rastie.


Použite nalievací tanier alebo rozprestretý tanier. Baktérie môžete umiestniť aj priamo na platňu na pozorovanie pod mikroskopom. Naneste kultúru na platňu a umiestnite ju pod mikroskop. Pozorujte, koľko je v nich buniek baktérií.


Uistite sa, že máte správnu koncentráciu. Ak je baktérií príliš veľa, budú sa prekrývať a nezískate presný počet. Zrieďte kultúru zmiešaním s väčším množstvom vývaru. Ak ich bude príliš málo, nebudete mať dostatok na presný počet. Odfiltrujte vývar pomocou filtračného systému alebo pridajte viac kultúry, ak ju máte k dispozícii.


Spočítajte baktérie. Posledným krokom je ich fyzické spočítanie. Pozrite sa cez lupu na komôrku na počítanie a zapíšte si, koľko ich vidíte. Porovnajte to s inými testami.

Metóda 2 z 3: Meranie mokrej a suchej hmotnosti


Uistite sa, že máte správne vybavenie. To si vyžaduje použitie drahého vybavenia a je časovo náročné. Ak vaše laboratórium nie je vybavené správnym vybavením, zvážte možnosť vyskúšať inú metódu. Ak však môžete, meranie mokrej a suchej hmotnosti vám poskytne konzistentnejšie údaje. Budete potrebovať: [3]

  • Hydraulická gravitačná konvekčná pec
  • Hliníková vážiaca miska
  • Súprava fliaš
  • Odstredivka alebo laboratórny filtračný systém


Uistite sa, že vaša kultúra je v banke. Ak nie, nalejte ho do jedného. V tejto fáze by mal byť v bujóne, hoci neskôr sa bude opäť oddeľovať.


Hliníkovú váhu vysušte v laboratórnej rúre. Alternatívou je celulózovo-acetátová filtračná membrána s priemerom 47 mm, 0.Veľkosť pórov 45 µm.[4]
Nech už použijete akúkoľvek, pred sušením ju odvážte, aby ste vedeli, koľko máte od merania neskôr odpočítať, keď na nej budete mať bunky baktérií.


Miešajte banku, do ktorej ste vložili kultúru, aby sa rovnomerne premiešala. Bunky prirodzene klesajú v dôsledku gravitácie. Premiešajte ich, aby ste sa uistili, že sú v banke rovnomerne rozložené. Takto získate reprezentatívnejšiu vzorku.


Na oddelenie buniek baktérií od vývaru použite odstredivku. Tento nástroj rýchlo otáča banku a protizávažie, čím vypúšťa bujón a ponecháva kultúru. Podrobnejší opis postupu nájdete v tejto príručke.


Vyškrabte pastu a položte ju na misku na váženie. Vývar zlikvidujte. Už ho nebudete potrebovať, ale budete potrebovať banky, preto si ich nechajte.


Odstredivku opláchnite a vodu z oplachovania nalejte do misky. Pridajte do banky s vodou na oplachovanie buniek baktérií. Takto získate vlhkú hmotnosť.


Zistite suchú hmotnosť. Ak chcete zmerať suchú hmotnosť, vložte nádobu do rúry a sušte pri teplote 100 ºC 6 až 24 hodín podľa pokynov konkrétnej rúry a/alebo váhy. Uistite sa, že ste neprekročili túto teplotu, aby sa baktérie nespálili. Po skončení sušenia baktérie odvážte a nezabudnite odpočítať hmotnosť váhy, aby ste získali suchú hmotnosť.[5]

Metóda 3 z 3:Meranie zákalu


Získajte potrebné vybavenie. Budete potrebovať zdroj svetla a spektrofotometer. Tieto sú k dispozícii v obchodoch s vedeckými laboratórnymi pomôckami. Spektrofotometer bude mať návod na správne použitie modelu, ktorý ste si kúpili. Toto zariadenie je lacné a ľahko sa používa, preto je to jedna z bežnejších metód merania rastu baktérií.[6]


Posvieťte si na vzorku. Laicky povedané, zákal znamená, ako veľmi je vzorka zakalená. Mali by ste získať údaj o zákale, ktorý sa meria v NTU (nefelometrické jednotky zákalu). Pred presným meraním zákalu vzorky môže byť potrebná kalibrácia vášho spektrofotometra, preto si pred použitím prečítajte referenčnú príručku výrobcu.


  • Urobte si niekoľko poznámok. Zákal zodpovedá množstvu baktérií vo vzorke. Spektrofotometer vám tiež ukáže percentuálnu transmisiu (%T). Toto číslo bude vyššie, ak je zákal nižší. Porovnajte svoje čísla z rôznych testov na meranie rastu baktérií.
  • Odkazy