Ako urobiť T-prieskum (mikrobiológia) (s obrázkami)

V prírode sa baktérie vyskytujú prakticky na každom možnom povrchu a, žiaľ, len zriedkavo existujú v izolovaných populáciách obsahujúcich jediný druh baktérie. To predstavuje pre mikrobiológov zaujímavú výzvu získať izolované kolónie baktérií metódou, ktorá je jednoduchá a rýchla. Trojsektorový prúžok alebo bežne označovaný ako „T-Streak“ je základná, ale kľúčová zručnosť, ktorú mikrobiológovia denne používajú na izoláciu, identifikáciu a štúdium kolónií baktérií.

Časť 1 z 5:Nakreslenie písmena T


Otočte na zadnú stranu sterilnej Petriho misky obsahujúcej agar. Nakreslite čiaru začínajúcu mierne nad stredovým bodom. Pokračujte v kreslení čiary, kým nenarazíte na okraj zadnej dosky.


Nakreslite ďalšiu čiaru začínajúcu na ľavej strane zadnej doštičky, kým nenarazíte na druhú stranu. Táto nová čiara by mala byť kolmá na pôvodnú čiaru a pretínať ju vo východiskovom bode. Zadná miska Petriho misky by teraz mala byť rozdelená na tri sektory, ktoré vyzerajú ako veľké „T“.


Označte zadnú dosku Petriho misky príslušnými laboratórnymi informáciami, ako sú vaše iniciály, dátum, čas a zdroj kultúry.

Časť 2 z 5:Sterilizácia očkovacej slučky

  • Aby sa eliminovala možnosť kontaminácie Petriho misky pri očkovaní povrchu agaru v Petriho miske, musí sa očkovacia slučka sterilizovať.


Začnite pripojením Bunsenovho horáka k zdroju paliva a jeho zapálením.


Vložte slučku do plameňa pod vertikálnym uhlom. Cieľom je, aby očkovacia slučka bola mierne nad vnútorným modrým kužeľom plameňa. Podržte ju tam niekoľko sekúnd.


Vyberte slučku z plameňa. V tejto chvíli je slučka sterilná a extrémne horúca.

  • Očkovacia slučka musí byť ochladená, inak zvyškové teplo usmrtí všetky baktérie odobraté z kultúry.


Ochlaďte očkovaciu slučku. Zdvihnite veko Petriho misky len natoľko, aby ste mohli vložiť slučku. Dotknite sa vonkajšieho okraja živného agaru. Pri prvom kontakte by sa mal ozvať prskavý zvuk. Pokračujte v držaní očkovacej slučky pri povrchu niekoľko sekúnd.


Vyberte očkovaciu slučku z Petriho misky. V tejto chvíli sa nedotýkajte žiadneho iného povrchu, pretože by ste tým opätovne kontaminovali očkovaciu slučku.

Časť 3 z 5:Inokulácia slučky bujónovou kultúrou


Sterilnú očkovaciu slučku držte. Otvorte zdroj kultúry, napríklad bujónovú kultúru.


Vložte slučku do kultúry a otáčajte obsahom, aby ste zabezpečili rovnomerné rozloženie baktérií vo vnútri. Tento postup vykonávajte niekoľko sekúnd.


Odstráňte slučku a obnovte pôvodnú vzorku.

Časť 4 z 5:Inokulácia slučky s naočkovanou kultúrou


Vyberte kolóniu alebo časť vzorky.


Odstráňte kryt z agarovej platne a vybranú vzorku naškrabte očkovacou slučkou.


Nasaďte späť kryt misky.

Časť 5 z 5:Inokulácia živného agaru


Zdvihnite veko Petriho misky len natoľko, aby ste mohli vložiť slučku. Začnite v hornom sektore písmena „T“ a zľahka ťahajte očkovaciu slučku po povrchu živného agaru cik-cak. Je dôležité zostať v oblasti, v ktorej práve očkujete.


Po naočkovaní prvého sektora písmena „T“ znovu sterilizujte očkovaciu slučku. Postupujte podľa metódy opísanej v časti Sterilizácia očkovacej slučky. Nezabudnite ochladiť očkovaciu slučku na okraji živného agaru, ktorý nebol kontaminovaný pôvodnou kultúrou!


Petriho misku otočte o 90 stupňov a zdvihnite veko len natoľko, aby ste mohli vložiť slučku.


Začnite v prvom sektore. Zľahka potiahnite očkovaciu slučku cez živný agar smerom k druhému sektoru.


Pokračujte do druhého sektora. Zľahka potiahnite očkovaciu slučku po živnom agare cik-cak vzorom.


Znovu sterilizujte očkovaciu slučku, keď je naočkovaný druhý sektor písmena „T“. Postupujte podľa metódy opísanej v Sterilizácia očkovacej slučky. Nezabudnite ochladiť očkovaciu slučku na okraji živného agaru, ktorý nebol kontaminovaný pôvodnou kultúrou!


Otočte Petriho misku o 90 stupňov a zdvihnite veko len natoľko, aby ste mohli vložiť slučku.


Začnite v druhom sektore. Zľahka potiahnite očkovaciu slučku po živnom agare smerom k tretiemu sektoru.


  • Pokračujte do tretieho sektora. Zľahka potiahnite očkovaciu slučku po živnom agare cik-cak vzorom.
  • Odkazy