Ako vykonať kalibráciu pipety: Ako postupovať pri kalibrácii pipety: 14 krokov (s obrázkami)

Pipety sú typom laboratórneho zariadenia, ktoré sa používa na meranie a prenos veľmi malých objemov kvapaliny. Presnosť a precíznosť pri meraní pipety sú nevyhnutné, pretože akákoľvek odchýlka v dávkovaných objemoch môže ovplyvniť výsledky experimentu. Na zabezpečenie presnosti je potrebné každých niekoľko mesiacov skontrolovať kalibráciu pipety. Proces kalibrácie pomáha skontrolovať, či zariadenie dávkuje správne objemy, aby sa dalo opraviť, ak tomu tak nie je.

Časť 1 z 2:Kontrola kalibrácie


Zhromaždite potrebný materiál. Na kontrolu kalibrácie pipety budete potrebovať pipetu, pipetovacie špičky, destilovanú vodu, kadičku, teplomer, váhu a váhové lodičky. Váha musí byť špecifická na mikrogramy, aby bolo možné kalibrovať mikropipety s maximálnym objemom 1 µl.[1]

  • Nebudete potrebovať viac ako 5 ml vody. Naplňte kadičku vodou.
  • Uistite sa, že špičky pipety sú správne špičky, ktoré správne pasujú na pipetu.


zmerajte teplotu destilovanej vody. Vložte teplomer do vody a nechajte ho tam aspoň jednu minútu. Ak sa červená čiara na teplomere stále pohybuje, nechajte ju ešte minútu. Po minúte zaznamenajte teplotu do zápisníka. Po skončení práce vyberte teplomer a osušte ho.[2]

  • Znalosť teploty vody je dôležitá pre výpočty, ktoré sa vykonajú na kontrolu kalibrácie.


Umiestnite váhu na váhu a vynulujte ju. Ideálne je použiť váhy, ktoré majú dvierka a sú izolovanou komorou. Vložte váhu do komory a zatvorte dvierka. Ak nemáte dvierka, jednoducho umiestnite vážiacu loďku na váhu. Stlačte tlačidlo „Zero“ alebo „Tare“ a počkajte, kým váha ukáže nulu.[3]

  • Nulovaním váhy sa odpočíta hmotnosť plastového člna a môžete merať len hmotnosť všetkého, čo do člna vložíte.


Pripravte pipetu na kalibráciu. Pred začiatkom merania utrite pipetu etanolom, aby ste zničili všetky nečistoty, a uistite sa, že koniec pipety nie je ničím upchatý. Umiestnite príslušnú špičku na koniec a nastavte objem, ktorý chcete testovať.[4]

  • Pri kalibrácii otestujte najmenší aj najväčší objem, ktorý môže pipeta dávkovať.[5]


Pred kalibráciou vopred opláchnite špičku. Stlačte tlačidlo na prvý doraz a strčte špičku do destilovanej vody tak, aby bola v kvapaline ponorená asi 2 mm. Uvoľnite tlačidlo, aby ste nasali trochu kvapaliny, a potom stlačením tlačidla nadol kvapalinu opäť dávkujte. Tento postup zopakujte trikrát, aby ste hrot vopred opláchli.[6]

  • Stlačte tlačidlo na druhú zarážku, aby ste vytlačili všetku kvapalinu, ktorá zostala v špičke, a vyberte pipetu z vody.


Odsajte kalibračný objem. Keď je špička mimo kvapaliny, stlačte tlačidlo až na prvú zarážku. Vložte približne 2 mm špičky do destilovanej vody a uvoľnite tlačidlo, aby ste nasali kvapalinu do špičky. Pred vybratím hrotu z vody počkajte približne 1 sekundu.[7]

  • Uistite sa, že hrot je počas celého procesu aspirácie úplne ponorený. V špičke nechcete mať žiadne bublinky, inak budú výsledky nesprávne.


Dávkujte kvapalinu do váhovej lodičky na váhe. Umiestnite špičku na dno váhového člnka a stlačte tlačidlo nadol na prvú zarážku. Presuňte sa na iné miesto mierne vzdialené od vody a stlačte tlačidlo na druhú zarážku. Držte tlačidlo stlačené a zdvihnite špičku z váhy.[8]

  • Ponechajte špičku na pipete, pretože ju opäť použijete na váženie ďalších kalibračných testov. Uistite sa, že sa hrot ničoho nedotýka.


Zaznamenajte hmotnosť na váhe. Ak používate váhu s komorou, zatvorte dvierka. Počkajte, kým sa čísla neprestanú meniť. Zaznamenajte si toto číslo do zápisníka.[9]

  • Pred zaznamenaním čísla je dôležité počkať, kým sa stabilizuje. Vaše údaje budú nesprávne, ak nepočkáte.


Tento postup opakujte, aby ste vykonali aspoň 10 meraní. Váhu vynulujte, špičku vopred opláchnite, nasajte rovnaký objem, dávkujte objem a potom zaznamenajte hmotnosť. Chcete mať viacero záznamov rovnakého objemu a potom ich môžete všetky spriemerovať.[10]

  • Ten istý postup môžete opakovať s rôznymi objemami, pokiaľ vykonáte viacero meraní na objem.

Časť 2 z 2:Výpočet výsledkov


Definujte vzorec pre vypočítaný objem. Vzorec na výpočet objemu dávkovaného pipetou je V = w * Z, kde w je hmotnosť vody, Z je konverzný faktor založený na hustote vody a V je vypočítaný objem, koľko vody bolo dávkované.

  • Premennú Z môžete zistiť vyhľadaním hustoty vody pomocou teploty zaznamenanej na začiatku experimentu.[11]
  • Napríklad: Ak bola teplota vody 23 °C, potom použijete hodnotu Z 1.0035 µg/mg.


Spriemerujte opakovania spolu. Objem vody vydanej pipetou ste mali odvážiť aspoň 10-krát. Ak chcete všetky tieto hodnoty spriemerovať, spočítajte ich a vydeľte desiatimi. Ak ste vykonali viac alebo menej pokusov, spočítajte jednotlivé pokusy a vydeľte ich celkovým počtom pokusov.

  • Napríklad: Desať hmotností, ktoré ste zaznamenali pre objem pipety 10 µl, je nasledujúcich: 9.89, 10.01, 10.02, 9.99, 9.95, 10.04, 9.96, 10.01, 9.99 a 9.98.
  • Priemer je: (9.89 + 10.01 + 10.02 + 9.99 + 9.95+ 10.04 + 9.96 + 10.01 + 9.99 + 9.98)/10 = 99.84/10 = 9.984


Doplňte premenné do rovnice a vyriešte ich. Po určení správnych čísel, ktoré použijete pre každú premennú, ich môžete dosadiť do rovnice a vyriešiť vypočítaný objem. Na vyriešenie stačí vynásobiť priemernú hmotnosť všetkých pokusov hodnotou Z.

  • Napríklad: V = w * Z = 9.984 * 1.0035 = 10.019


Vypočítajte presnosť pipety. Na výpočet presnosti môžete použiť rovnicu A = 100 x Vavg/V0, kde A je presnosť pipety, Vavg je priemerný vypočítaný objem a V0 je hodnota, ktorú ste nastavili na dávkovanie pipety. Presnosť by mala byť v rozmedzí 99-101 %.[12]

  • Ak je pipeta správne kalibrovaná, vypočítaná hodnota by mala byť veľmi blízka skutočnej hodnote, ktorú ste nastavili na pipete.
  • Napríklad: A = 100 x Vavg/V0 = 100 x 10.019/10 = 100 x 1.0019 = 100.19%
  • Táto konkrétna pipeta je správne kalibrovaná.

  • V prípade potreby pošlite pipetu na kalibráciu. Ak vaša pipeta nevyhovie kalibračnému testu, okamžite ju prestaňte používať na experimenty. Pipety sú veľmi jemné a drahé laboratórne zariadenia. Kalibráciu nemôžete opraviť sami, takže ich budete musieť poslať na riadny servis. Prípadne niektoré spoločnosti prídu do vášho laboratória a kalibrujú vaše pipety priamo tam.[13]

    • Obráťte sa na spoločnosť, ktorá vyrába vašu konkrétnu značku pipety, aby vám poskytla servisné služby.
  • Odkazy