Ako vykonať sériové riedenie: 9 krokov (s obrázkami)

Riedenie v chémii je proces, ktorý znižuje koncentráciu látky v roztoku. Sériové riedenie je opakované riedenie roztoku s cieľom rýchlo zvýšiť faktor riedenia.[1]
Bežne sa vykonáva pri experimentoch, ktoré si vyžadujú vysoko zriedené roztoky, napríklad pri pokusoch, ktoré zahŕňajú krivky koncentrácie na logaritmickej stupnici alebo keď určujete hustotu baktérií. Sériové riedenia sa vo veľkej miere používajú v experimentálnych vedách, ako je biochémia, mikrobiológia, farmakológia a fyzika.

Metóda 1 z 2:Vykonanie základného riedenia


Určite správnu riediacu kvapalinu. Kvapalina, v ktorej budete riediť svoju látku, je veľmi dôležitá. Mnohé roztoky sa riedia destilovanou vodou, ale nie vždy je to tak. Ak riedite baktérie alebo iné bunky, pravdepodobne budete chcieť riediť v kultivačnom médiu.[2]
Kvapalina, ktorú ste si vybrali, sa použije pre každé sériové riedenie.

  • Ak si nie ste istí, akú kvapalinu použiť, požiadajte o pomoc alebo sa pozrite na internete, či podobné riedenie vykonali iní ľudia.


Pripravte si niekoľko skúmaviek s 9 ml riediacej kvapaliny. Tieto skúmavky vám budú slúžiť ako slepé vzorky na riedenie.[3]
Neriedenú vzorku pridáte do prvej skúmavky a potom ju budete postupne riediť do nasledujúcich skúmaviek.

  • Je užitočné označiť všetky skúmavky pred začiatkom, aby ste sa nezmýlili, keď začnete s riedením.
  • Každá skúmavka bude 10-násobným riedením počnúc neriedenou skúmavkou.[4]
    V prvej skúmavke bude riedenie 1:10, v druhej 1:100, v tretej 1:1000 atď. Vopred určte počet riedení, ktoré potrebujete urobiť, aby ste neplytvali skúmavkami ani riediacou kvapalinou.


Pripravte si skúmavku s najmenej 2 ml neriedeného roztoku. Minimálne množstvo potrebné na vykonanie tohto sériového riedenia je 1 ml neriedeného roztoku. Ak máte len 1 ml, nebudete mať žiadny zvyšný neriedený roztok. Označte túto skúmavku US pre neriedený roztok.

  • Pred začatím akéhokoľvek riedenia roztok dôkladne premiešajte.[5]


Vykonajte prvé riedenie. Natiahnite 1 ml neriedeného roztoku zo skúmavky US pipetou a prenesie sa do skúmavky s označením 1:10 obsahujúci 9 ml riediacej kvapaliny a dôkladne premiešajte. V 9 ml riediacej kvapaliny je teraz 1 ml neriedeného roztoku. Roztok bol teda zriedený 10-krát.


Vykonajte druhé riedenie. Na druhé sériové riedenie odoberiete 1 ml roztoku zo skúmavky 1:10 a pridajte ju do 9 ml riediacej kvapaliny v skúmavke 1:100. Dôkladne premiešajte skúmavku 1:10 pred pridaním do ďalšej skúmavky. Opäť skúmavku premiešajte 1:100 nasledujúce riedenie. Roztok zo skúmavky 1:10 bol zriedený 10-násobne do skúmavky 1:100.


Rozšírte tento postup na vykonávanie dlhších sériových riedení. Tento postup sa môže opakovať toľkokrát, koľkokrát je potrebné na dosiahnutie požadovaného roztoku. Pri experimente zahŕňajúcom krivky koncentrácie môžete použiť sériové riedenie na vytvorenie série roztokov s riedením 1, 1:10, 1:100, 1:1 000.

Metóda 2 z 2:Výpočet konečného faktora riedenia a koncentrácie


Vypočítajte konečné riedenie pomer pri sériovom riedení. Celkový pomer riedenia možno určiť vynásobením riediaceho faktora každého kroku vedúceho k poslednému kroku. Matematicky sa to dá znázorniť rovnicou Dt = D1 x D2 x D3 x … x Dn kde Dt je celkový faktor riedenia a Dn je pomer riedenia.[6]

  • Povedzme napríklad, že ste zriedili kvapalinu v pomere 1:10 4-krát. Do rovnice dosaďte svoj faktor riedenia: Dt = 10 x 10 x 10 x 10 = 10 000
  • Konečný faktor riedenia štvrtej skúmavky vo vašom sériovom riedení je 1:10 000. Koncentrácia vašej látky je teraz 10 000-krát menšia ako pôvodný neriedený roztok.


Určte koncentráciu roztoku po zriedení. Na určenie konečnej koncentrácie vášho roztoku po sériovom riedení budete potrebovať poznať východiskovú koncentráciu. Rovnica je Cfinal = Cpočiatočná/D kde Ckonečný je konečná koncentrácia zriedeného roztoku, Cpočiatočné je počiatočná koncentrácia pôvodného roztoku a D je predtým určený pomer riedenia.[7]

  • Napríklad: Ak ste začali s roztokom buniek s koncentráciou 1 000 000 buniek na ml a váš pomer riedenia je 1 000, aká je konečná koncentrácia vašej zriedenej vzorky?
  • Pomocou rovnice:
    • Ckonečný = Cpočiatočné/D
    • Czáverečné = 1,000,000/1,000
    • Czáverečná = 1 000 buniek na ml.

  • Skontrolujte, či sa všetky jednotky zhodujú. Pri vykonávaní akéhokoľvek výpočtu sa chcete uistiť, že sa vaše jednotky na konci vždy zhodujú.[8]
    Ak ste začali s bunkami na ml, uistite sa, že končíte s bunkami na ml. Ak je vaša počiatočná koncentrácia v častiach na milión (ppm), potom vaša konečná koncentrácia musí byť ppm.
  • Odkazy