Ako vytvoriť agar: 10 krokov (s obrázkami)

Či už doma vykonávate vlastné vedecké experimenty, alebo chcete ušetriť trochu peňazí v laboratóriu, začnite si miešať vlastné agarové médium. Agar je materiál podobný gélu, ktorý sa vyrába z rias alebo živočíšnych bielkovín a môžete ho použiť na pestovanie baktérií pre svoje experimenty. Hoci na vytvorenie agaru nie je potrebné veľa, váš jednoduchý agarový prášok alebo domáca zmes má všetky živiny, ktoré mikróby potrebujú na rast. Keď si pripravíte jeden z typov agarového média, nalejte ho do Petriho misiek so vzorkami a vypestujte niekoľko zárodkov!

Zložky

Základný živný agar

  • 2 1/2 čajovej lyžičky (4.6 g) agarového prášku
  • 3⁄4 šálka (180 ml) plus 1 1⁄2 polievková lyžica (22 ml) destilovanej vody

Vyrobí dostatočné množstvo média na 10 Petriho misiek

Domáci agar

  • 1 kocka hovädzieho bujónu
  • 2 čajové lyžičky (8 g) cukru
  • 1 šálka (240 ml) destilovanej vody
  • 1 balenie (2 1/2 čajovej lyžičky alebo 7 g) neochutenej želatíny

Vyrobte dostatočné množstvo média na 6 Petriho misiek

Časť 1 z 2:Výroba a sterilizácia agarového média


Zahrievajte kadičku a Petriho misky v rúre s teplotou 177 °C (350 °F) 2 až 3 hodiny. Na sterilizáciu zariadenia zakryte vrch laboratórnej kadičky s objemom 1 000 ml fóliou. Budete tiež musieť dať fóliu na 6 až 10 sklenených Petriho misiek. Vložte všetko vybavenie do studenej rúry a potom ju zapnite na 350 °F (177 °C). Zariadenia zahrievajte 2 až 3 hodiny a nechajte ich úplne vychladnúť, kým budete pokračovať vo výrobe agaru.[1]

  • Ak nemáte Petriho misky, použite sklenené nádobky na detskú výživu s odstránenými štítkami. Zakryte ich fóliou a sterilizujte v rúre spolu s kadičkou.


Zložky média nalejte do kadičky. Keď je kadička vychladnutá, položte ju na pracovnú plochu. Ak chcete ušetriť čas, použite výživný agarový prášok, ktorý sa hodí na akýkoľvek typ experimentu, ktorý robíte. Nalejte 3⁄4 šálka (180 ml) plus 1 1⁄2 polievkové lyžice (22 ml) destilovanej vody do kadičky spolu s 2 1/2 čajovej lyžičky (4.6 g) agarového prášku. Ak si chcete vyrobiť domáce médium z vecí zo špajze, dajte do kadičky namiesto toho tieto prísady: [2]

  • 1 kocka hovädzieho bujónu
  • 2 čajové lyžičky (8 g) cukru
  • 1 šálka (240 ml) destilovanej vody
  • 1 balenie (2 1/2 čajovej lyžičky alebo 7 g) neochutenej želatíny

Vedeli ste, že: Hoci môžete použiť domáce médium na mnohé experimenty, nemusí fungovať, ak baktérie vo vašom experimente jedia bielkoviny. Je to preto, že želatína v domácom médiu obsahuje bielkoviny, takže médium môže skvapalnieť.


Zmes priveďte do varu na horúcej platni na 1 minútu. Ak máte vedeckú horúcu platňu, nastavte ju na vysokú teplotu a postavte na ňu kadičku. Nasaďte si tepelne odolné rukavice a veľmi opatrne krúžte kadičkou, aby sa zmes spojila. Varte ho 1 minútu, pričom kadičku otáčajte.[3]

  • Ak nemáte horúci tanier, vložte kadičku do mikrovlnnej rúry a ohrievajte ju v 10-sekundových intervaloch, kým zmes nezovrie.
  • Uistite sa, že sa agarový prášok alebo bujónová zmes úplne rozpustí.


Ochlaďte agarové médium na teplotu 120 °F (49 °C). Vypnite teplo a nechajte agarové médium niekoľko minút vychladnúť. Potom vložte teplomer, aby ste zistili, či sa ochladila na 120 °F (49 °C) predtým, ako ju nalejete do Petriho misiek.[4]

  • Ak nemáte teplomer na kontrolu teploty, pred použitím média počkajte asi 10 až 15 minút.

Časť 2 z 2:Nalievanie agarových platní


Svoj pracovný priestor dezinfikujte izopropylalkoholom alebo zriedeným bielidlom. Namočte čistú handričku do izopropylalkoholu alebo zriedenej zmesi bielidla a utrite ju po pracovnej ploche, aby ste odstránili baktérie. Ak chcete zriediť bielidlo, zmiešajte 1 diel bielidla so 4 dielmi vody.[5]

  • Po dezinfekcii priestoru venujte minútu umývaniu rúk.


Označte dno každej Petriho misky informáciami o experimente. Umiestnite Petriho misky na pracovnú plochu tak, aby boli hore dnom. Vezmite si fixku a označte každú misku informáciami, ktoré potrebujete na experiment.[6]

  • Môžete napríklad napísať baktériu, dátum a svoje iniciály.


Obráťte Petriho misky a utrite ústie kadičky alkoholovou utierkou. Obráťte sterilizované Petriho misky na čistú pracovnú plochu a vyberte alkoholovú utierku z obalu. Utrite ho okolo ústia kadičky, aby ste zabránili kontaktu baktérií s agarovým médiom.[7]


Nalejte 1⁄4 v (0.64 cm) média do každej misky a nasaďte viečka. Nalievajte pomaly, aby ste do média nevniesli vzduchové bubliny. Hneď ako pokryjete dno Petriho misky 1⁄4 palec (0.64 cm) média, nasaďte vrchnák, aby ste zabránili kontaminácii.[8]

  • Opakujte to pre každú Petriho misku, ktorú máte.


Nechajte nádoby asi 30 minút odstáť, aby agar stuhol. Petriho misky nepremiestňujte hneď po naplnení, pretože potrebujú čas na dosiahnutie gélu. Asi po 30 minútach skontrolujte, či je agar nepriehľadný a tuhý.[9]


  • Obráťte nádoby hore dnom a uložte ich do chladničky. Je dôležité uložiť Petriho misky hore dnom, aby kondenzát nekvapkal na agar. Agárové médium vydrží v chladničke až 2 roky.[10]

    Tip: Snažte sa používať domáce agarové médium rýchlejšie ako médium vyrobené z agarového prášku, pretože zložky sa môžu rýchlejšie rozložiť.

  • Odkazy